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分光光度技术的定性和定量方法-转

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发表于 2014-3-5 10:40:33 | 显示全部楼层 |阅读模式
一、分光光度技术的定性方法
对待测物质进行定性分析的依据是最大吸收波长λmax 和摩尔吸光系数ε。
1.最大吸收波长λm ax 方法
将不同波长的光透过待测物溶液测定其吸光度,用波长和吸光度作图可找出最大吸 收峰,其相应的波长为最大吸收波长λmax ,和标准品的λmax 相比较,可对待测物质进 行定性分析。
2.摩尔消光系数ε方法
准确配制待测物质的溶液,在最大吸收波长处测定其吸光度值,根据Lambert-Beer 定律ε=A/(L ×C),可计算出待测物的ε,和已知ε的标准液相比较,可对待测物质进 行定性分析。
7 H. g' \2 J; o. D7 `/ ]8 h/ N; r 二、分光光度技术的定量方法
1.标准曲线法
根据Lambert-Beer 定律,液体的浓度在一定范围内与吸光度成正比关系。配制一 系列浓度的标准品溶液 (浓度应包含高、中、低浓度范围),按标本处理方法作相同处 理,在特定波长下测定吸光度,以标准液浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,按最小二 乘法的原理,将对应各点连成一条通过原点的直线,这条直线称为标准曲线。待测溶液 测定吸光度后,从标准曲线上可查出其相应的浓度。
制作和应用标准曲线时应注意下面几点:
(1) 测定条件发生变化时 (如更换标准品和试剂等),应重新绘制。
(2) 标准品应有高的纯度,标准液的配制应准确。
(3) 当待测液吸光度超过线性范围时,应将标本稀释后再测定。
(4) 标本测定的条件应和标准曲线制作时的条件完全一致。
2.比较法
已知浓度的标准品和标本作同样处理,使用相同的空白,同时测定标准管和标本的 吸光度,根据测定的吸光度及标准品浓度,可直接计算出标本的浓度,计算公式为:
Cu = (A u ×Cs)/As
其中Cu 和A u 为标本管浓度和吸光度,Cs 和 As 分别为标准管浓度和吸光度。用标 准品法定量时,标准品的浓度应尽量和标本管浓度相近。
3.其它分析方法
包括差示法、多组分混合物分析和利用摩尔吸光系数分析等方法。

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发表于 2014-6-11 11:58:08 | 显示全部楼层
楼主辛苦了,鼓励一下












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